產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Q-瓊脂糖凝膠HP是將季銨基團(tuán)鍵合在瓊脂糖微球上形成的一種強(qiáng)陰離子交換介質(zhì)。具有高分辨率，高載量，回收率高和再生能力強(qiáng)等特點(diǎn)?；瘜W(xué)穩(wěn)定性好，可用氫氧化鈉在位清洗。基質(zhì)的親水特性保證在洗脫過(guò)程中減少細(xì)胞衍生雜質(zhì)的非特異性吸附。可用于蛋白質(zhì)、核酸及多肽的離子交換制備。
產(chǎn)品參數(shù)
產(chǎn)品名稱：Q-瓊脂糖凝膠HP (Q- Sepharose  High Performance)
貨號(hào)：S9200
基質(zhì)：6% 交聯(lián)瓊脂糖凝膠
配基：季銨
交換基團(tuán)：- N+(CH3)3
離子容量：0.14-0.20 mmolCl-/mL
顆粒大小：34μm
蛋白載量：10mg lgG，24mg HAS/mL
工作pH：1~14(短時(shí)間 ，在位清洗)；2~12(長(zhǎng)時(shí)間)
化學(xué)穩(wěn)定性：在以下溶液中穩(wěn)定- 1mol/L NaOH；8mol/L尿素；6mol/L鹽酸胍；30%異丙醇；70%乙醇；30%SDS，30%乙腈；
使用方法
1. 裝柱
（1）       將所有的試劑和填料達(dá)到室溫.配制初始緩沖液(平衡液)和緩沖液。
（2）       根據(jù)柱子大小取所需凝膠的量，清洗掉20%乙醇，抽干，用初始緩沖液（按凝膠：緩沖液=3:1比例）配成勻漿。
（3）       將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤(rùn)濕并保持一小段液體（液面略高于濾膜），務(wù)必使底端無(wú)氣泡。
（4）       用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi)，注意不要使用氣泡。打開(kāi)柱子出液口，使凝膠在柱內(nèi)自由沉降，連結(jié)好柱子頂端柱頭。
（5）       打開(kāi)蠕動(dòng)泵，讓緩沖液用使用時(shí)流速的1.33倍的流速流過(guò)，使柱床穩(wěn)定。用2-3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。
2.平衡
讓平衡緩沖液以一定流速流過(guò)柱子，到流出液電導(dǎo)和pH不變。平衡緩沖液一般是高鹽濃度的緩沖液，如：Tris、PBS等。
3. 上樣
（1）  樣品用平衡液配制，渾濁的樣品要離心、過(guò)濾后上柱；
（2）  一般情況是讓目標(biāo)產(chǎn)品結(jié)合在柱子上，用平衡洗液洗去雜質(zhì)，再選擇一種洗脫液洗下目標(biāo)產(chǎn)品。
（3）  介質(zhì)對(duì)樣品組分吸附的程度取決于樣品的帶電性質(zhì)、流動(dòng)相的離子強(qiáng)度和pH值。鹽濃度越小，介質(zhì)對(duì)組分吸附越牢。
4.  洗脫
Q瓊脂糖凝膠介質(zhì)可用增大鹽濃度或減小pH值進(jìn)行洗脫，常用增大鹽濃度的辦法洗脫。
5. 再生
一般用高鹽濃度的緩沖液（含1~2mol/L NaCl）洗或減小pH洗10倍以上柱體積，接著用結(jié)合蛋白的平衡液洗到平衡，可再次使用。
若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)在再生時(shí)洗不掉，可用在位清洗（CIP）除去。
6.在位清洗
（1） 對(duì)于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白，可以用2M  NaCl去除。
（2）對(duì)沉淀蛋白、以疏水作用結(jié)合的蛋白或者脂類物質(zhì)，可用1M NaOH去除。
（3）對(duì)強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白、脂類等，可用4-10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗，但要注意有機(jī)溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加，否則容易產(chǎn)生氣泡。
清洗完畢后，用至少3倍柱體積緩沖液平衡柱子。
7. 去熱源
用0.5M的氫氧化鈉清洗柱子5-6小時(shí)或者用0.1M的氫氧化鈉24小時(shí)。或用以下步驟去除：
（1） 2倍柱體積的70%的乙醇；
（2）  2倍柱體積50Mm Tris-HcL Ph7.5
（3） 1倍柱體積4M尿素
（4） 3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1M  NaCl;
以上緩沖液都在無(wú)熱源的雙蒸水中配制。
8. 消毒
用0.5-1.0 M NaOH 室溫下洗8-10倍柱體積，初始緩沖液平衡柱子。
注意事項(xiàng)
（1）  密封貯存于4°C-28°C（保存溶液為20%乙醇），通風(fēng)、干燥的地方，不能冷凍。用過(guò)的柱子貯存于4°C（20%乙醇）。
（2）  在裝柱、使用和保存柱子的時(shí)候，要避免柱子流干，氣泡進(jìn)入。

  備注：產(chǎn)品信息可能會(huì)有優(yōu)化升級(jí)。請(qǐng)以實(shí)際標(biāo)簽信息為準(zhǔn)。
 

Q-瓊脂糖凝膠HP

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